一、概述
結(jié)核-γ干擾素釋放試驗(yàn)(TB-IGRA)原理如下:
特異性刺激抗原“esat6和cfp10”是致病性結(jié)核分枝桿菌特有而卡介苗、其它分枝桿菌沒有的獨(dú)特片段。
結(jié)核分枝桿菌感染者體內(nèi)擁有針對(duì)每種抗原的特異性T淋巴細(xì)胞,能識(shí)別、遞呈這些抗原,并刺激T淋巴細(xì)胞增殖、釋放細(xì)胞因子,如IFN-γ??赏ㄟ^ELISA方法定量檢測(cè)體外釋放的特異性IFN-γ,從而判斷是否感染結(jié)核分枝桿菌。
二、TB-IGRA過程
A、刺激過程示意圖:
B、檢測(cè)過程示意圖:
三、使用方法推薦(ELISA)
A、刺激原的量:1ug/管
B、ELISA試劑使用推薦:
C6H4:1:1000包被抗體過夜。洗板、封閉。加樣100ul,同時(shí)加入20ul 1:2000稀釋的8A11-F(ab)2-HRP,洗板、顯色、終止。
C、標(biāo)準(zhǔn)品定量范圍
以校準(zhǔn)品吸光度均值為自變量(X),其對(duì)應(yīng)的IFN-γ的含量(12.5 pg/ml~400 pg/ml)為因變量(Y),進(jìn)行乘冪擬合,求出線性回歸方程為y=167.64x0.9554,數(shù)據(jù)及示意圖如下:
校準(zhǔn)品值 | 2.294 | 1.277 | 0.621 | 0.275 | 0.136 | 0.065 |
校準(zhǔn)品IFN-γ含量 (單位:pg/ml) | 400 | 200 | 100 | 50 | 25 | 12.5 |
四、結(jié)果判定推薦
測(cè)試培養(yǎng)管(T)含量值=T、本底對(duì)照培養(yǎng)管(N)含量值=N、陽性對(duì)照培養(yǎng)管(P)含量值=P(單位:pg/ml)
N | P-N | T-N | 結(jié)果判定 | 結(jié)果解釋 |
≤400 | 任何值 | ≥14 并且≥(N/4) | 陽性 | 感染結(jié)核分枝桿菌 (結(jié)核活動(dòng)期感染、潛伏感染或隱性感染) |
≥20 | <14 | 陰性 | 未感染結(jié)核分枝桿菌 | |
≥20 | ≥14但<(N/4) | 陰性 | ||
<20 | <14 | 不確定 | 不能確定是否感染結(jié)核分枝桿菌 | |
<20 | ≥14但<(N/4) | 不確定 | ||
>400 | 任何值 | 任何值 | 不確定 |
五、性能評(píng)估
*參照澳大利亞QFT試劑
六、原料信息